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離子色譜--在高效液相色譜的觸角之外

點(diǎn)擊次數(shù):3423  更新時(shí)間:2020-11-02
離子色譜--在高效液相色譜的觸角之外 
 
高效液相色譜(HPLC)和離子色譜(IC)都是制藥、食品和環(huán)境等領(lǐng)域分析實(shí)驗(yàn)室的常用設(shè)備,尤其是HPLC,在一家單位中有幾十乃至幾百臺(tái)HPLC同時(shí)運(yùn)轉(zhuǎn)的情形并不少見,IC的數(shù)量雖然比HPLC少一些,但是也經(jīng)常可以見到,那么二者究竟有什么異同呢?下面我們一起來看一下吧!

1、什么是液相色譜?

液相色譜是指對(duì)樣品中的化合物進(jìn)行分離并定量的一類物理化學(xué)技術(shù),通常由攜帶樣品的流動(dòng)相和對(duì)樣品中化合物起到分離作用的固定相組成。現(xiàn)代液相色譜的固定相通常為粒徑在μm范圍的小顆粒,并填充到空心柱中,以分離柱的形式呈現(xiàn)。

樣品中化合物的分離取決于各組分與固定相結(jié)合能力的強(qiáng)弱,與固定相結(jié)合較強(qiáng)的,在分離柱中有更好的保留,不容易被流動(dòng)相沖出,而與固定相結(jié)合較弱的組分,則在固定相中保留較差,流動(dòng)相稍稍沖洗即可流出,這樣利用待分離組分與固定相結(jié)合能力的強(qiáng)弱,便可達(dá)到對(duì)樣品中化合物進(jìn)行分離的目的,然后使用不同的檢測(cè)技術(shù)便可對(duì)不同的化合物定量。

離子色譜(IC)和高效液相色譜(HPLC)是經(jīng)常用的兩種液相色譜技術(shù)。對(duì)于各個(gè)行業(yè)來說,從原材料檢驗(yàn)到添加劑分析,再到終產(chǎn)品的質(zhì)量控制,它們都是*的工具。

 

2HPLCIC的不同之處

分離機(jī)理不同

在HPLC中,待測(cè)物質(zhì)的分離是基于該物質(zhì)與固定相的親水相互作用(正相HPLC)或疏水相互作用(反相HPLC),因此HPLC適用于極性和非極性有機(jī)化合物的分離。 其中反相HPLC的應(yīng)用較為普遍,一般使用有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相。在IC中經(jīng)常用的分離機(jī)制是離子交換,根據(jù)待測(cè)物的不同,還可以使用離子排斥和離子對(duì)兩種分離機(jī)理進(jìn)行分離。在使用離子交換機(jī)理進(jìn)行分離時(shí),待測(cè)離子與固定相表面的離子交換基團(tuán)發(fā)生交換,屬于化學(xué)反應(yīng),而不像HPLC,分離僅僅依靠物理吸附作用。而且,當(dāng)離子色譜選擇合適的色譜柱時(shí),也可以分離非離子化合物和極性化合物。

 

流動(dòng)相不同

HPLC的分離是使用有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相進(jìn)行的,通常使用梯度洗脫來獲得弱保留分析物的良好分離度并加快強(qiáng)保留分析物的洗脫。為了與洗脫液混溶,通常也將樣品溶解在有機(jī)溶劑中。與HPLC相反,離子色譜法中的分離在水相中進(jìn)行,典型的流動(dòng)相一般由超純水和溶解的鹽或酸組成。絕大多數(shù)IC分離可通過等度洗脫進(jìn)行,僅有少數(shù)分離需要梯度洗脫。

 

分離柱不同

IC和HPLC中的分離柱均采用基于表面改性的顆粒作為固定相,待分離的分析物與固定相發(fā)生相互作用,實(shí)現(xiàn)分離。 但是二者固定相的表面官能化有所不同:IC中的固定相以陰離子或陽離子交換基團(tuán)為特征,而HPLC則依賴于非極性(反相HPLC)或極性(正相HPLC)官能團(tuán)。此外IC與HPLC的分離柱所使用的外殼也有所不同,HPLC分離柱一般使用不銹鋼外殼,而由于IC的流動(dòng)相容易與不銹鋼發(fā)生腐蝕反應(yīng),所以IC分離柱一般采用惰性的PEEK外殼。

 

檢測(cè)器不同

HPLC中使用的主要檢測(cè)器是UV檢測(cè)器。UV檢測(cè)器能夠檢測(cè)具有紫外光吸收的物質(zhì):從分離柱流出的流動(dòng)相會(huì)受到紫外線的照射,根據(jù)在不含樣品的流動(dòng)相和含有樣品的流動(dòng)相之間測(cè)得的吸光度差異,便可以對(duì)分析物進(jìn)行定量。而IC則主要采用電導(dǎo)檢測(cè)器,通過測(cè)量流動(dòng)相電導(dǎo)率的變化來檢測(cè)和定量分析物,靈敏度較高。

抑制器

離子色譜中樣品的分離需要使用可以導(dǎo)電的鹽或酸流動(dòng)相,這樣造成電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)到的信號(hào)背景值很高,嚴(yán)重降低檢測(cè)靈敏度,此時(shí)需要使用抑制器來抑制背景信號(hào)值,增加檢測(cè)靈敏度,而HPLC則不存在這個(gè)問題,因此也不需要抑制器。

 

3ICHPLC的有力補(bǔ)充

離子色譜法在水、食品和藥品的分析中都具有廣泛的應(yīng)用,典型樣品的范圍從超純水和飲用水到嚴(yán)重污染的廢水,從環(huán)境樣品到食品和飲料樣品,IC可以分析其中從萬億分之幾到百分之幾濃度的物質(zhì),其中極性物質(zhì)尤其是陰陽離子的分析,IC具有*的優(yōu)勢(shì),是HPLC強(qiáng)有力的補(bǔ)充。

 

藥物分析

左乙拉西坦藥物是一種用于治療癲癇病的藥物,氯化物和溴化物是其中的雜質(zhì), HPLC無法分離這些陰離子雜質(zhì),但氯離子和溴離子在IC色譜柱上可以很好的分離并通過抑制電導(dǎo)檢測(cè)從而達(dá)到高靈敏度和高精度的測(cè)定。

左乙拉西坦中氯離子和溴離子的測(cè)定

水質(zhì)分析

近些年來環(huán)境問題越來越受到大家的關(guān)注,其中水質(zhì)是環(huán)境領(lǐng)域中十分重要的內(nèi)容,生態(tài)環(huán)境部?jī)H近幾年發(fā)布的一系列標(biāo)準(zhǔn)中有多項(xiàng)涉及到水中離子類物質(zhì)的檢測(cè),這些都是HPLC無法涉及的領(lǐng)域,卻是IC擅長(zhǎng)的。

HJ 84-2016水質(zhì) 無機(jī)陰離子(F-、Cl-、NO2-、Br-、NO3-、PO43-、SO32-、SO42-)的測(cè)定 離子色譜法

食品分析

除了離子類物質(zhì)的檢測(cè)之外,IC使用安培檢測(cè)器進(jìn)行糖類物質(zhì)的檢測(cè),也具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)便等HPLC*的優(yōu)勢(shì),因此近使用IC檢測(cè)食品中的糖類的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)也陸續(xù)發(fā)布。

GB5009.255—2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中果聚糖的測(cè)定

 

除以上內(nèi)容外,離子色譜近幾年在藥品氨基糖苷類抗生素的檢測(cè)、水中消毒副產(chǎn)物的檢測(cè)、食品中糖類和部分維生素的檢測(cè)等方面,進(jìn)展十分迅速,想了解更多信息請(qǐng)致電上海恪瑞儀器科技有限公司,公司全體員工將竭誠(chéng)為您服務(wù)!

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